洞察：流式细胞术检测网织红细胞的标准化操作流程

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织红细胞是一种未完全成熟红细胞。在细胞成熟过程中，其胞质中的RNA含量逐渐被血红蛋白所取代，因此，检测红细胞中RNA的含量多少，就代表了红细胞的成熟程度。从而成为检测织红细胞的重要方法。织红细胞计数可以判断骨髓红细胞系统造血情况。溶血性贫血时由于大量织红细胞进入血循环，可使织红细胞高达020或更高。急性失血后5~10d，织红细胞达高峰。2周后恢复正常。典型再生障碍性贫血病例，织红细胞百分比常为0005。织红细胞数低于5X109L且为诊断再生障碍性贫血的标准之一。织红细胞升高表示骨髓红细胞增生活跃，多见于各种急慢性失血溶血和治疗有效的各类增生性贫血，如缺铁性贫血、溶血性贫血、巨幼细胞性贫血等，是贫血治疗中非常高价值的监测指标。织红细胞减低见于各种骨髓增生能力低下的疾病，尤多见于重型再生障碍性贫血等。


材料与仪器

试剂、试剂盒PBS派若宁Y工作液Good缓冲液枸橼酸钠缓冲液戊二醛缓冲液EDTA


步骤

1抽取全血05ml，注入盛有05ml的01molLEDTA溶液中。
2用微量取液器取50uIEDTA抗凝血，置于另一离心管道中，加入Good缓冲液50ml，以1000rmin离心5min，连续洗3次。3将沉淀细胞加入10ml枸橼酸钠缓冲液，轻轻振荡悬浮。4将悬浮液缓慢注入盛有4ml01%戊二醛缓冲液中固定15min。5上FCM之前，用PBS洗去固定液，加入05ml001%的派若宁Y工作液，染色30min离心沉淀物，去染液，然后1500rmin离心5min。6用PBS洗1次，以1500rmin离心5min，去上清液，再用PBS将细胞悬浮，上机检测。

来源：丁香验